扬州饲料黄曲霉毒素B1测试 奶制品黄曲霉毒素检测
更新:2025-01-26 08:59 编号:16593977 发布IP:180.108.108.11 浏览:57次- 发布企业
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详细介绍
作为生物毒素的一种,黄曲霉毒素是一类强烈的致癌物,是曲霉菌等菌类的高毒代物,包括黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2等,在湿热的储存环境下食品和饲料中出现的几率很高。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的代谢物,当奶牛喂食被污染的饲料后,黄曲霉毒素B1通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1,进而污染牛奶。
检测项目
黄曲霉毒素(M1、B1、B2、G1、G2)
检测范围
大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油、饲料等制品
黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的研究机构划定为1类致癌物。目前已鉴定分离出AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2、AFP1、AFQ1和AFH1等十多种黄曲霉毒素,其中黄曲霉毒素B1(AflatoxinB1,简称AFB1)的毒性和致癌性强。AFB1的强毒性、高致癌性以及存在的广泛性,对人类健康安全和畜牧业等造成了严重的威胁。
检测[1]
目前可分离定量检测AFB1的方法主要有薄层色谱法,高效液相色谱法,液相色谱-串联质谱法以及免疫分析方法。这些方法大多需要体积庞大、价格昂贵的检测设备,并且操作步骤繁琐,检测周期长,不利于现场即时检测。开发一种基于血糖仪检测B1的方法,实现对B1这一非糖靶目标的快速简单、高灵敏度检测,具有广泛的应用前景。
一种利用血糖仪定量检测黄曲霉毒素B1的方法,包括以下步骤:
步骤一:制备纳米金-蔗糖酶-适配体检测探针复合物;
步骤二:将黄曲霉毒素B1的单克隆,4℃孵育12h;用缓冲液B冲洗;加入封闭缓冲液,室温封闭1h;用缓冲液A冲洗,完成黄曲霉毒素B1的单克隆的固定;
步骤三:向步骤二的黄曲霉毒素B1的单克隆中加入不同浓度的黄曲霉毒素B1待测液,37℃孵育1h,使黄曲霉毒素B1与黄曲霉毒素B1的单克隆进行特异性结合,用缓冲液A冲洗未与单克隆结合的黄曲霉毒素B1,得到黄曲霉毒素B1与单克隆的结合体;
步骤四:在步骤三所得的结合体中加入步骤一制备的纳米金-蔗糖酶-适配体检测探针复合物,37℃孵育2h,形成具有夹心式结构的单克隆-黄曲霉毒素B1-检测探针复合物,未与结合体上的黄曲霉毒素B1结合的纳米金-蔗糖酶-适配体检测探针复合物留在上层上清液中;
步骤五:取步骤四的上清液,加入蔗糖溶液,37℃孵育30min后,用血糖仪进行定量检测。
地,所述制备纳米金-蔗糖酶-适配体检测探针复合物的步骤如下:
a)将蔗糖酶加入到胶体金中混合,4℃孵育6h,得到纳米金-蔗糖酶复合物;
b)向黄曲霉毒素B1的适配体中加入TCEP试剂,室温,黑暗条件下,反应2h激活黄曲 霉毒素B1的适配体;
c)将步骤b)激活后的黄曲霉毒素B1的适配体加入到步骤a)的纳米金-蔗糖酶复合物中,在振荡培养箱中50r/min、37℃孵育16h,形成纳米金-蔗糖酶-适配体复合物;
d)将步骤c)的纳米金-蔗糖酶-适配体复合物离心,取出上清液,先用少量的缓冲液A冲洗沉淀物,再用缓冲液A溶解沉淀物,室温涡旋震荡5min,得到纳米金-蔗糖酶-适 配体检测探针,并在4℃保存。
成立日期 | 2020年07月01日 | ||
法定代表人 | 周乐辉 | ||
注册资本 | 1000 | ||
经营范围 | 无损、环境、土壤、水质、金属材料、劳保用品等检测服务 | ||
公司简介 | 江苏广分检测技术有限公司:核心价值观:安全第一,公正廉洁,尊长敬司,创新为魂,应用为重,励精图治。经营服务理念:用心服务,用先进科学检测技术为客户发现、消除火灾隐患,追求安全与经营效益的双赢,造福社会。企业行为准则:方法科学,诚信经营,坚持原则,为客户提供公正、科学、高效的优质服务。员工行为准则:诚实守信,尊长敬业;笑看得失,莫议人非;爱岗敬业,和合处世;技术精湛,服务至上;遵章守法,勇担责任。公 ... |
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